Après le refroidissement initial, la perfusion de cryoprotecteurs à faible concentration commence par une canulation aortique. La perfusion et le refroidissement continu sont effectués à l'aide d'une machine cœur-poumon. Au fur et à mesure que le patient continue à se refroidir, des concentrations plus fortes de solutions cryoprotectrices sont perfusées jusqu'à ce que la concentration soit suffisamment élevée pour la
vitrification. La température finale atteinte pendant la cryopréservation est de -76°C (température de la glace sèche). À ce stade, la perfusion est arrêtée et l'accent est mis sur le maintien de la température.