Protocolli di Riscaldamento
Problema: il riscaldamento dei tessuti criopreservati, soprattutto quando si tratta di volumi più grandi (come gli organi o il cervello), esaspera le complessità legate alla criopreservazione dei tessuti. La nucleazione e la formazione di ghiaccio, ad esempio, sono molto più difficili da controllare durante il riscaldamento da temperature criogeniche che durante il raffreddamento.
Sviluppo: Sono necessari protocolli e metodi di riscaldamento specifici. Questo aspetto verrà studiato prima su animali più piccoli e poi su organismi sempre più grandi e complessi.
Protocolli di Riperfusione
Problema: per eliminare le CPA e ristabilire la circolazione, il tessuto deve essere riperfuso e rifornito di ossigeno. Questo comporta una serie di complessità, come il danno da riperfusione.
Sviluppo: Fondamentalmente è necessario formulare dei concetti per effettuare la perfusione dopo la criopreservazione. Questo aspetto verrà studiato prima su animali più piccoli e poi su organismi sempre più grandi e complessi.
Concetti per la Riparazione
Problema: tutto ciò che viene fatto durante il processo di criopreservazione è fatto per ridurre la quantità di danni cellulari e sub-cellulari causati dai processi attivi e passivi avviati dopo l'arresto circolatorio e dalle procedure stesse. Tuttavia, i danni continuano ad accumularsi.
Sviluppo: In totale dovranno essere riparati quattro tipi di danni: 1) danni precedenti all'arresto circolatorio (ad esempio, dovuti a malattie o a degrado generale), 2) danni che si verificano dopo l'arresto circolatorio a causa dell'ischemia (ad esempio, processi apoptotici e necrotici), 3) danni causati dala criopreservazione stessa (ad esempio, tossicità, nucleazione di ghiaccio, ecc.) e 4) danni causati dalle procedure di riscaldamento e riperfusione (ad esempio, nucleazione di ghiaccio). Inutile dire che è necessaria un'importante ricerca di base per capire cosa sia necessario per eseguire queste riparazioni.
Ripristino della Vita
Problema: esistono idee preliminari per il ripristino della vita, ma non ci sono ancora prove sperimentali. È necessaria una ricerca significativa per capire come il ripristino della vita potrebbe funzionare concettualmente e praticamente.
Sviluppo: Una volta che il riscaldamento, la riperfusione e la riparazione sono stati compresi ed eseguiti, tutte le procedure si uniscono in una sorta di "rianimazione" simile a come la rianimazione cardiopolmonare è composta da diverse parti che portano al "ripristino della vita" in caso di attacco cardiaco. Prima che progetti di ricerca applicati abbiano senso, è necessario svolgere molti lavori di base concettuali e teorici.
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