Protocolos de calentamiento
Problema: Calentar el tejido criopreservado, especialmente cuando se trata de volúmenes más grandes (como los órganos o el cerebro) agrava las complejidades que conlleva la criopreservación del tejido. La nucleación y formación de hielo, por ejemplo, es mucho más difícil de controlar cuando se calienta desde temperaturas criogénicas que cuando se enfría hasta ellas.
Desarrollo: Se requieren protocolos y métodos de calentamiento específicos. Esto se investigará primero en animales más pequeños y luego, cada vez más, en organismos más grandes y complejos.
Protocolos de reperfusión
Problema: Para eliminar los CPA y restablecer la circulación, el tejido necesita volver a ser perfundido y reabastecerse de oxígeno. Esto conlleva su propio conjunto de complejidades, como la lesión por reperfusión.
Desarrollo: Fundamentalmente hay que formular los conceptos para hacer la perfusión después de la criopreservación. Esto se investigará primero en animales más pequeños y luego, cada vez más, en organismos más grandes y complejos.
Conceptos para la reparación
Problema: Todo lo que se hace durante el proceso de criopreservación se hace para reducir la cantidad de daños celulares y subcelulares que se producen debido a los procesos activos y pasivos iniciados tras la parada circulatoria y por los propios procedimientos. Sin embargo, los daños siguen acumulándose.
Desarrollo: En total, habrá que reparar cuatro tipos de daños 1) daños anteriores a la parada circulatoria (por ejemplo, debidos a enfermedades o a la degradación general), 2) daños posteriores a la circulación debidos a la isquemia (por ejemplo, procesos apoptóticos y necróticos), 3) daños derivados de la propia criopreservación (por ejemplo, toxicidad, nucleación de hielo, etc.), y 4) daños derivados de los procedimientos de calentamiento y reperfusión (por ejemplo, nucleación de hielo). Ni que decir que se necesita una importante investigación básica para comprender lo que se necesita para realizar estas reparaciones.
Restauración de la vida
Problema: Hay ideas preliminares para la restauración de la vida, pero aún no hay pruebas experimentales. Se necesita una investigación importante para comprender cómo puede funcionar la restauración de la vida, tanto desde el punto de vista conceptual como práctico.
Desarrollo: Una vez que se comprenda y se realice el calentamiento, la reperfusión y la reparación, todos los procedimientos confluyen en una especie de "reanimación" similar a la forma en que la reanimación cardiopulmonar se compone de diferentes partes que conducen al "restablecimiento de la vida" en caso de infarto. Hay que hacer mucho trabajo conceptual y teórico antes de que tengan sentido más proyectos de investigación aplicada.