Techniques modernes de cryoconservation

Dewars modernes de stockage cryogénique (ITS)

Chez Tomorrow.bio, nous recherchons en permanence de nouveaux moyens d'améliorer notre procédure de cryoprotection et de conservation. Les étapes initiales du processus sont affinées par les équipes SST qui fournissent la seule procédure professionnelle de cryoprotection du corps entier sur le terrain disponible à l'heure actuelle. Des agents cryoprotecteurs de pointe sont déployés pour minimiser les dommages cellulaires pendant le refroidissement. En outre, l'azote liquide fournit un environnement de stockage trÚs stable pour les patients cryoconservés.

MalgrĂ© tous ces efforts, des efforts scientifiques supplĂ©mentaires pourraient rĂ©vĂ©ler de nombreuses façons d'amĂ©liorer la cryoconservation. La façon dont les patients cryoconservĂ©s sont actuellement conservĂ©s est un point Ă  prendre en considĂ©ration. DĂ©couvrez dans cet article pourquoi il en est ainsi et quelle pourrait ĂȘtre la solution proposĂ©e.

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Quelle est la méthode de stockage actuellement utilisée ?

Actuellement, la plupart des personnes cryoconservĂ©es sont conservĂ©es dans de l'azote liquide Ă  une tempĂ©rature de -196°C. Cette mĂ©thode peu coĂ»teuse et durable n'utilise pas d'Ă©lectricitĂ©. Cette mĂ©thode peu coĂ»teuse et durable ne consomme pas d'Ă©lectricitĂ© et est relativement facile Ă  entretenir, de nouvelles rĂ©serves d'azote liquide ne devant ĂȘtre ajoutĂ©es qu'une fois par semaine. Quel est donc le problĂšme ?

Lors de la cryoconservation, les patients entrent dans un état de vitrification à une température d'environ -130°C. Ils sont ensuite lentement refroidis jusqu'à -196°C, la température naturelle de l'azote liquide. AprÚs cet événement, ils sont lentement refroidis jusqu'à -196°C, la température naturelle de l'azote liquide, à partir de laquelle leur température corporelle reste statique.

Le problÚme ne réside pas dans le stockage à long terme, mais plutÎt dans ce qui se passe avant et aprÚs.

La température de -196°C n'offre pas (de maniÚre pertinente) une meilleure conservation que celle de -130°C. Il se trouve que l'azote liquide possÚde une température avec laquelle la cryoconservation peut fonctionner. En fait, il serait plus pratique pour notre cause que la température de l'azote liquide soit plus proche (mais toujours inférieure) du point de transition vitreuse.

Dans le cadre d'un stockage rĂ©gulier, un refroidissement uniforme minimise les contraintes thermiques du tissu lorsqu'il passe en dessous de la tempĂ©rature de vitrification. Le stress peut ĂȘtre encore rĂ©duit en maintenant la tempĂ©rature prĂšs du point de transition vitreuse pendant un certain temps peu aprĂšs la vitrification. Cela permet une relaxation supplĂ©mentaire des contraintes avant que le corps ne soit refroidi davantage.

Le processus de refroidissement Ă  cette tempĂ©rature trĂšs froide provoque la fracture des tissus, entre autres types de dommages que nous essayons de prĂ©venir. Les blessures de ce type n'empĂȘchent pas nĂ©cessairement la prĂ©servation d'informations neuroanatomiques cruciales, mais elles compliquent la rĂ©cupĂ©ration future.

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Pourquoi le refroidissement endommage-t-il les tissus ?

Les molécules vibrent, ce qui entraßne la manifestation d'un volume ou d'une densité typique à une température donnée. Lorsque la température diminue, le volume de l'objet qui y est exposé diminue également. Ce phénomÚne est appelé "contraction thermique".

Lorsqu'un objet est vitrifié, son intérieur, plus chaud, se refroidit plus rapidement que son enveloppe extérieure, et sa taille diminue un peu plus vite[1]. [Comme l'intérieur et l'extérieur sont attachés l'un à l'autre, cette différence de taille peut provoquer des fractures, endommageant ainsi le tissu.

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Qu'est-ce que le stockage à température intermédiaire ?

La fracturation peut ĂȘtre rĂ©duite, et potentiellement (presque) Ă©vitĂ©e, en refroidissant lentement jusqu'Ă  la tempĂ©rature de transition vitreuse et en maintenant une tempĂ©rature plus proche du point de vitrification.

Ce systÚme est appelé "stockage à température intermédiaire", car sa température se situe entre celle de la vitrification et celle de l'azote liquide.

Le stress thermique du tissu est moins important lorsque le refroidissement au-delĂ  de la tempĂ©rature de transition vitreuse est arrĂȘtĂ© plus tĂŽt. Selon des donnĂ©es antĂ©rieures[2], les dommages sont d'autant plus susceptibles de se produire que le tissu a Ă©tĂ© refroidi rapidement.

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Avantages et défis du stockage à température intermédiaire

Malgré ses avantages théoriques, les systÚmes ITS ne sont pas couramment utilisés aujourd'hui pour la cryoconservation en dehors des procédures de recherche. Cela est principalement dû à la pléthore de défis et de complications que la méthode entraßne.

Tout d'abord, l'utilisation de systÚmes ITS présente un facteur de risque beaucoup plus élevé que le systÚme actuellement utilisé, à savoir le stockage de l'azote liquide par immersion. Les dewars traditionnels de stockage à -196°C sont maintenus presque remplis jusqu'en haut, contenant plus de 1000 litres de liquide à l'intérieur. Cette quantité d'azote liquide est suffisante pour assurer la conservation pendant plus d'une semaine, avant qu'un nouveau remplissage ne soit nécessaire. Les dewars ITS ordinaires, quant à eux, ne contiennent qu'environ 120 litres d'azote liquide au fond du dispositif de stockage, ce qui est tout au plus suffisant pour 5 jours de stockage à une température de -140°C.

En outre, les dewars ITS consomment deux fois plus d'azote liquide que leurs homologues plus froids, alors qu'ils ne font qu'un tiers de leur taille. Tout comme les dewars ordinaires, ils sont Ă©quipĂ©s pour se remplir automatiquement, mais nĂ©cessitent davantage de ressources et de vĂ©rifications pour garantir le maintien d'une tempĂ©rature stable. Si l'on tient compte du fait que des fluctuations de tempĂ©rature (potentiellement dommageables) sont plus susceptibles de se produire, les dewars ITS s'avĂšrent en fin de compte ĂȘtre une option moins fiable et moins sĂ»re.

Il est possible de remédier à ces inconvénients, mais cela s'accompagne d'une augmentation exponentielle des coûts d'entretien du stockage.

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